Ви є тут

АКТИВНІСТЬ ТА ІЗОФОРМИ АЦЕТИЛХОЛІНЕСТЕРАЗИ ЗА ІНКУБУВАННЯ СПЕРМИ БУГАЇВ

У статті наведено показники вивчення вмісту загального білка, активності та ізоформи ацетилхолінестерази (АХЕ) за інкубування сперми бугаїв. Встановлено, що за інкубування еякулятів упродовж 48 год за 2–4 ºC знижується вміст загального білка (p<0,05−0,01) і активність ацетилхолінестерази (АХЕ) в цільній спермі, плазмі і сперміях (р<0,05). За вказаних умов зменшується кількість ізоформ АХЕ в розділяючому 7,5 % поліакриламідному гелі (ПААГ), знижується інтенсивність їх зафарбування і виявляються активні протеїни ензиму в концентруючому гелі (3,5 % ПААГ). Особливістю інкубованої сперми, порівняно зі свіжоотриманою, є присутність АХЕ0-ізоформи та відсутність АХЕ8 − у всіх досліджених зразках і АХЕ3 − у сперміях. Зміни вмісту ізоформ за інкубування протягом 48 год за 2–4 ºC, порівняно зі свіжоотриманими еякулятами, характеризуються зростанням АХЕ1, АХЕ4 і АХЕ5 (майже 70,0 % від загального вмісту ізоформ) в цільній спермі, АХЕ4 і АХЕ5 (майже 50,0 %) − у плазмі, АХЕ0 і АХЕ1 (40,9 %) − у сперміях.

Ключові слова: ацетилхолінестераза, ізоформи, сперма, бугаї.

1. Nelson L. Sperm motility in “Fertilization”/L. Nelson, C. B. Metz, A. Monroy // Academic Press: New York, 1967. − Vol. 1. − P. 27–97.

2. Репродуктивна функція і андрологічна диспансеризація бугаїв / М.В. Косенко, Б.М. Чухрій, І.Я. Коцюмбас [та ін.]. − Львів, 2007. − 186 с.

3. Meizel S. Electrophoretic studies of esterases of bull spermatozoa, cytoplasmic droplets and seminal plasma / S. Meizel, O. Boggs, J. Cotham // The journal of histochemistry and cytochemistry. − 1971. − Vol. 19, № 4. − P. 226−231.

4. Насєдкіна Н.В. Ізоформи холінестерази у спермі та репродуктивних органах бугаїв / Н.В. Насєдкіна, Н.В. Кузьміна, Д.Д. Остапів // Біологія тварин. − Львів, 2012. − Т.14, № 1−2. − С. 169−173.

5. Наук В.А. Структурно-функциональные особенности сперматозоидов сельскохозяйственных животных при криоконсервации и разработка эффективных способов их длительного хранения: автореф. дис. на соискание уч. степени д-ра биол. наук: спец. 03.00.04 − Биохимия / В.А. Наук − Харьков, 1987. − 32 с.

6. Лабораторні методи досліджень у біології, тваринництві та ветеринарній медицині: довідник / [В.В. Влізло, Р.С. Федорук, І.Б. Ратич та ін.]; за ред. В.В. Влізла. − Львів: СПОЛОМ, 2012. − 764 с.

7. Lowry O.H. Protein measurement with Folin-Phenol reagent / O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Fair, R.J. Randall // J. Biol. Chem. − 1951. − Vol. 193. № 1. − P. 265–275.

8. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии: справочник / А.И. Карпищенко. − СПб.: Інтермедика, 2002. – C. 45–46.

9. Maynard E.A. Electrophoretic studies of cholinesterases in brain and muscle of the developing chicken / E.A. Maynard // J. Exp. Zool. − 1966. − Vol. 161. − P. 319–336.

10. Плохинский Н. А. Биометрия / Н.А. Плохинский. − Москва: МГУ, 1970. − 358 с.

11. Cordoba M. Heparin and quercitin generate differential metabolic pathways that inVve aminotransferases and LDH-X dehydrogenase in cryopreserved bovine spermatozoa. / M. Cordoba, L.N. Pintos, M.T. Beconi // Theriogenology. − 2007. − Vol. 67, № 3. − P. 648−654.

12. Сайко А. А. Физиолоґическая роль ацетилхолина в сперме животных / А.А. Сайко // Сельскохозяйственная биолоґия. − 1969. − Т.4, № 5. − С. 759–765.

13. Stewart T.A. Acetylcholinesterase and choline acetyltransferase in ram spermatozoa / T.A. Stewart, I.T. Forrester // Biol Reprod. − 1978. − Vol. 19. − P. 271−279.

14. Expression of choline acetyltransferase mRNA in spermatogenic cells results in an accumulation of the enzyme in the postacrosomal region of mature spermatozoa / [C.F. Ibanez, M. Pelto-Huikko, O. Soder et al.] // Proc Natl Acad Sci USA. − 1991. − Vol. 88. − P. 3676−3680.

15. Bray C. Nicotinic Acetylcholine Receptor Is Involved in the Acrosome Reaction of Human Sperm Initiated by Recombinant Human ZP3 / C. Bray, Jung-Ho Son, S. A. Meizel // Biology of Reproduction. − 2002. − Vol. 67, № 3. − P. 782−788.