Ви є тут
Підбір тварин-донорів для виготовлення імунних ешерихіозних діагностичних сироваток
Стратегія «Єдине здоров’я» передбачає контроль всіх процесів за виробництва харчових продуктів у ланцюгу «від поля до столу». Виявлення біотоксикантів, зокрема ентеротоксигенних кишкових паличок, можна здійснювати різними методами. Однак жоден з них не можна віднести до експрес-методів. Метод флуоресціюючих антитіл (МФА), який поєднує в собі об’єктивність мікроскопічного методу та високу специфічність імунологічних реакцій, можна застосувати з цією метою. Аналіз звітів (FAO) свідчить, що контроль за наявністю ентеропатогенних кишкових паличок – важлива складова стратегії «Єдине здоров’я». Розробка експрес-методів індикації та іденти фікації ентеротоксигенних кишкових паличок є актуальною темою наукових пошуків. До таких можна віднести МФА. Діагностична ефективність МФА залежить від активності та специфічності ешерихіозних сироваток, що, зокрема, залежить від тварин-донорів, схем імунізації та антигенності вакцинних препаратів. Мета досліджень – дати порівняльну оцінку двох схем імунізації різних видів тварин вакцинним препаратом із інактивованих мікробних клітин E. coli. Як вакцинний препарат використано 5-мільярдну суспензію мікробних клітин 24-годинної культури ентеротоксигенного β-гемолітичного штаму E. coli на триптон-соєвому дріжджовому бульйоні, інактивованих формальдегідом (0,4 % до об’єму культури), концентрованих аеросилом А-300 (3 мг/мл). Як тварин-донорів використано кролів, баранів, бугаїв та коней, по 6 голів кожного виду, підібраних за принципом аналогів (за віком, живою масою та умовами утримання і годівлі). Усі тварини були клінічно здорові. Використано дві схеми імунізації тварин. За першої схеми імунізації вакцинний препарат вводили підшкірно триразово, а за другої – чотириразово, з інтервалом 4 доби у 2-кратно зростаючих дозах. Забір крові для дослідження проводили на 21-шу добу після останнього уведення вакцинного препарату. Рівень аглютинінів визначали у реакції аглютинації (РА). Як антиген використали 2-мільярдну суспензію інактивованих клітин E. coli. РА ставили в об’ємі 1 см3. За титр приймали останнє розведення сироватки, в якому спостерігали аглютинацію не мен ше як на 2 плюси. Найвищі титри аглютинінів виявлено в сироватці крові кролів – 1:7253±1389 (за першої схеми імунізації) і 1:9387±853 (за другої схеми). Дещо нижчі титри антитіл виявлено в сироватці крові баранів – 1:5547±1028 (за першої схеми) і 1:8533±1079 (за другої схеми) та коней – 1:5973±1428 і 1:6827±1079, відповід но, а найнижчі – в сироватці крові бугаїв – 1:4267±540 (перша схема) і 1:4693±427 (друга). Це свідчить, що на один і той же антиген імунна система різних видів тварин реагує по-різному. Встановлено, що різниця у рівнях аглютинінів між другою і першою схемами імунізації в овець становить 35 %, у кролів – 22,8 %, в коней – 12,5 % і ВРХ – 9,1 %. Отже, четверте уведення препарату підсилює гуморальну відповідь в імунізованих тварин. Проте, воно призводить до розвитку стресу і сенсибілізації у тварин. Тому, для отримання активних ешерихіозних сироваток достатньо триразового уведення препарату. У процесі імунізації ешерихіозним антигеном найвищі титри аглютинінів були в сироватці крові кролів (1:9387±853) та баранів (1:8533±1079), дещо менші – у коней (1:6827±1079) і бугаїв (1:4693±427). Схема імунізації, що передбачає триразове з інтервалом у 4 доби парантеральне уведення вакцинних препаратів у двократно зростаючих дозах, стимулює високий рівень аглютинінів, не спричиняє стресу, а тому може бути використана для отримання високоактивних ешерихіозних сироваток.
Ключові слова: ентеротоксигенні кишкові палички, схеми імунізації, вакцинні препарати, тварини-донори, реакція аглюти нації, антигени бактерій.
- Safety and Immunogenicity of a Chimeric Subunit Vaccine against Shiga Toxin-Producing Escherichia coli in Pregnant Cows / R.M. Vidal et al. International Journal of Molecular Sciences. 2023. Vol. 24. no. 3. 2771 p. DOI:10.3390/IJMS24032771.
- Головко А.М., Напненко О.О. Біологічна безпека та біозахист – основа протидії новим біологічним загрозам і викликам. Ветеринарна медицина. 2024. Вип. 110. С. 5–7. DOI:10.36016/VM-2024-110-1.
- Бегас В.Л., Горбачова В.П. Аспекти правового регулювання принципу «Єдине здоров’я» в Україні: зб. матер. Всеукраїнської науково-практичної інтернет-конференції «Єдине здоров’я»: реалії і перспективи». Житомир: ПНУ, 2024. С. 6–9.
- Бащенко М.І., Мандигра М.С., Стегній Б.Т., Герілович А.П. Актуальні проблеми біологічної безпеки в контексті реалізації стратегії МЕБ, ВООЗ, ФАО «Єдине здоров’я». Ветеринарна медицина. 2016. Вип. 102. С. 5–8.
- Galaburda M., Yustyniuk V., Galat M., Jokelainen P. Jean Monnet Module “Integration of the EU One Health Framework and Policies in Ukraine” at the Faculty of Veterinary Medicine, University of Life and Environmental Sciences of Ukraine: матер. міжнар. наук. конф. «Єдине здоров’я». 2022. С. 164–165.
- Bacterial travellers’ diarrhoea: A narrative review of literature published over the past 10 years / R. Lopez-Velez et al. Travel Med. andInfect. Disease. 2022. Vol. 47. Р. 1–13. DOI:10.1016/j.tmaid.2022.102293.
- Jenkins С. Enteroaggregative Escherichia coli. Curr Top Microbiol Immunol. 2018. Vol. 416. P. 27–50. DOI:10.1007/82_2018_105.
- Oral and Parenteral Vaccination against Escherichia coli in Piglets Results in Different Responses / G. Ramis et al. Animals. 2022. Vol. 12. No 20. 2758 p. DOI:10.3390/ani12202758.
- Можливості імунофлуоресцентного методу в лабораторній діагностиці інфекційних хвороб / О. Бойко та ін. Нотатки сучасної біології. 2021. № 1. Ч. 1. С. 93–102. DOI:10.29038/NCbio.21/1
- РА і РНГА – як імунологічні методи контролю антигенності вакцин проти сальмонельозу птиці / О.П. Бойко та ін. Науковий вісник ЛНУ ВМБ імені С.З. Ґжицького. Ветеринарні науки, 2022. Т. 24. № 105. С. 102–108. DOI:10.32718/NVLVET10515.
- Laramore C.R., Moritz C.W. Fluorescent antibody technique in detection of Salmonella in animal feed and feed ingredients. Appl. Microbial. 1969. Vol. 17. No 3. Р. 352–354. DOI:10.1128/am.17.3.352 354.1969.
- Atamas V.A. Production of immunofluorescent lactoglobulin and its use for diagnosing calf paratyphoid. Prevention and Treatment of Diseases in Agricultural Animals in Southern Ukraine: Proceedings of the Odessa Agricultural Institute. 1968. No 2. P. 27–32.
- Bulatova T.I., Ivanova L.G., Matveev K.I. Application of highly specific antibotulinum sera for detection of Clostridium botulinum types F and B using the luminescent-serological method. Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. 1971. No 9. P. 101–106.
- BattyJ., Walker P.D. Differentiation of Clostridium septicum and Clostridium chauvoei by the use of fluorescent labelled antibodies. J. Pathol. Bact. 1963. Vol. 85. No 2. Р. 517–521.
- Knox A., Zerna G., Beddoe T. Current and Future Advances in the Detection and Surveillance of Biosecurity-Relevant Equine Bacterial Diseases Using Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP). Animals. 2023. Vol. 13. No 16. 2663 p. DOI:10.3390/ani13162663.
- Strategies and innovations for combatting diseases in animals (Review) / M. Ahmad et al. World Academy of Sciences Journal. 2024. Vol. 6. No 6. DOI:10.3892/wasj.2024.270.
- Arshadi N., Mousavi S.L., Amani J., Avicenna N.S. Immunogenic Potency of Formalin and Heat Inactivated E. coli O157:H7 in Mouse Model Administered by Different Routes. J Med Biotechnol. 2020. Vol.12. No 3. Р. 194–200.
- A chimeric protein-based vaccine elicits a strong IgG antibody response and confers partial protection against Shiga toxin-producing Escherichia coli in mice / D.A. Montero et al. Front Immunol. 2023. Vol. 27. No 14. Р. 1–17. DOІ:10.3389/fimmu.2023.1186368.
- Jarso H.A., Eskeziyaw M.B., Mengistu Y.D., Tessema S.T. Designing of immunodiagnostic assay using polyclonal antibodies for detection of Enteropathogenic Escherichia coli strains. PLOS ONE. 2024. Vol. 19. No 12. DOI:10.1371/journal.pone.0315848.
- Chandler H.M. Rabbit immunoglobulin responses to the flagella, somatic and protective antigens of highly protective strain of Clostridium chauvoei. Infection and Immunity. 1975. Vol. 12. No 1. Р. 143–147. DOI:10.1128/iai.12.1.143-147.1975.
- Sharma V.K., Schaut R.G., Loving C.L. Vaccination with killed whole-cells of Escherichia coli O157:H7 hha mutant emulsified with an adjuvant induced vaccine strain-specific serum antibodies and reduced E. coli O157:H7 fecal shedding in cattle. Vet Microbiol. 2018. Vol. 219. Р. 190–199. DOI:10.1016/j.vetmic.2018.04.003.
- Івченко В.М., Шарандак В.В., Горбатюк О.І., Абрамов А.В. Імунологічні методи досліджень в лабораторіях ветеринарної медицини. Біла Церква: БЦНАУ, 2006. 99 с.
- Storz H. Geretetechnik-bedingte problem bei der Immunfluoreszen-mikroskopie. Ztschr. Ges. Inn. Med. 1983. Vol. 38. Р. 101–104.
- Boyko P.K. Immunofluorescent identification of the causative agent of emphysematous carbuncle: author's abstract. dissertation ... candidate of veterinary sciences. 16.00.03. M: MBA, 1982. 24 p.
- Optimizing the protection of cattle against Escherichia coli O157:H7 colonization through im munization with different combinations of H7flagellin, Tir, Intimin-531 or EspA / T.N. McNeilly et al. PLoS ONE. 2015. Vol. 10. No 5. DOI:10.1371/journal.pone.0128391.
- Berman J.W. Amplification of the biotin-avidinimmunofluorescence technique. J. Immunol. Methods. 1980. Vol. 36. No 3–4. Р. 335–339. DOI:10.1016/0022-1759(80)90138-6.
- Immune response of horses to inactivated African horse sickness vaccines / M. Rodríguez et al. BMC Veterinary Research. 2020. Vol. 16. No 1. DOI:10.1186/s12917-020-02540-y. al.
- Evaluation of immunogenicity and dose dependent immune response against common bovine originated mastitogens in rabbit model / B.A. Shah et 2023. Vol. 33. No 3. DOI:10.36899/japs.2023.3.0645.
Долучення | Розмір |
---|---|
![]() | 590.12 КБ |